Megazyme試劑盒的檢測原理:
脫脂干燥后的樣品經(jīng)熱穩(wěn)定a-淀FEN酶、蛋白酶和淀粉葡萄糖苷酶酶解消化,酶解液通過乙醇沉淀、過濾,乙醇和丙酮洗滌殘渣后干燥、稱重,得到總膳食纖維(TDF)殘渣;
酶解液通過直接過濾、熱水洗滌殘渣,干燥后稱重,得到不溶性膳食纖維殘渣;
濾液用乙醇沉淀,過濾、干燥、稱重,得到可溶性膳食纖維殘渣。
TDF、IDF和SDF的殘渣扣除蛋白質(zhì)、灰分和空白即得TDF、IDF和SDF含量。
Megazyme試劑盒的技術(shù)特性:
(1)、抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
(2)、結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
?。?)、酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。
?。?)、受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。
(5)、此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
?。?)、加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度,并且重復性好。以免疫學反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。